Fiches de Biologie Cellulaire (ou Ce Qu'il Faut Savoir Pour Les ED En Plus De Ses Cours...) I Méthodes d'étude des protéines Le poids moléculaire (PM) Le PM s'exprime en kilo Dalton (kDa) et s'estime par électrophorèse. Le PM théorique est le PM calculé à partir du nombre d'acides aminés de la protéine (voir infra). C'est le PM de la protéine avant les modifications post-traductionnelles éventuelles. Le PM après purification à partir des cellules est le PM après les modifications post- traductionelles éventuelles. C'est le PM de la protéine in vivo (dans les conditions cellulaires physiologiques). Le nombre de résidus d'acides aminés et la longueur de l'ARNm Le nombre d'acides aminés de la protéine est extrait de la séquence de son ARNm ou de celle de son ADNc (ADN complémentaire). Pour connaître la longueur (en nucléotides) de la région codante de l'ARNm de la protéine, on multiplie la longueur (en acides aminés) de la protéine par 3. Par ex ici : • longueur de la protéine = 753 acides aminés • longueur de la région codante de son ARNm = 753 x 3 = 2 259 nucléotides Cette technique ne permet que de connaître la taille de la région codante de l'ARNm car, sans informations supplémentaires, on ne peut pas connaître la longueur des introns excisés et donc la longueur totale de l'ARNm de la protéine. Pour connaître la longueur de la région non-codante de l'ARNm, on soustrait la taille de la région codante à la longueur totale de l'ARNm.