The behavior of DASPMI in living cells [Elektronische Ressource] : spectrally and spatially resolved fluorescence lifetime imaging / von Radhan Ramadass

The Behavior of DASPMI in Living Cells: Spectrally and Spatially Resolved Fluorescence Lifetime Imaging Dissertation zur Erlangung des Doktorgrades der Naturwissenschaften vorgelegt beim Fachbereich Biochemie, Chemie und Pharmazie der Goethe-Universität in Frankfurt am Main von Radhan Ramadass aus Chingleputt, Indien Frankfurt am Main 2008 (D30) vom Fachbereich Biochemie, Chemie und Pharmazie der Goethe-Universität als Dissertation angenommen. Dekan: Prof. Dr. Harald Schwalbe 1. Gutachter: Prof. Dr. Jürgen Bereiter-Hahn 2. Gutachter: Prof. Dr. Josef Wachtveitl Datum der Disputation: TABLE OF CONTENTS TABLE OF CONTENTS SUMMARY I ZUSAMMENFASSUNG V 1. INTRODUCTION 1 1.1 Fluorescence Microscopy 1 1.2 Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy 2 1.3 Molecular Fluorescence 4 1.4 DASPMI as a Unique Probe for Mitochondrial Membrane Potential 6 Objectives of this Dissertation 9 2. MATERIALS AND METHODS 14 2.1 Time- and Space-Resolved Fluorescence Decay Microscopy 14 2.1.1 DL-detector (Spectrally Resolved Fluorescence Decays) 16 2.1.2 QA-detector (Spatially Resolved Fluorescence Decays) 17 2.2 TRPV4-Microfilament Interactions 18 2.2.1 Cell Culture 18 2.2.2 Constructs 19 2.2.3 Steady-State Fluorescence Images 19 2.2.