Structural analysis of human growth hormone with respect to the dominant expression of GH mutations in isolated growth hormone deficiency type II [Elektronische Ressource] / vorgelegt von Daniel I Iliev

Aus der Universitätsklinik für Kinder- und Jugendmedizin Tübingen Abteilung Kinderheilkunde I mit Poliklinik Ärztlicher Direktor: Professor Dr. D. Niethammer Sektion Pädiatrische Endokrinologie Leiter: Professor Dr. M.B. Ranke Structural Analysis of Human Growth Hormone with Respect to the Dominant Expression of GH Mutations in Isolated Growth Hormone Deficiency Type II Inaugural-Dissertation zur Erlangung des Doktorgrades der Medizin der Medizinischen Fakultät der Eberhard-Karls-Universität zu Tübingen vorgelegt von Daniel I Iliev aus Sofia, Bulgarien 2005 Dekan: Professor Dr. C. D. Claussen 1. Berichterstatter: Privatdozent Dr. G. Binder 2. Berichterstatter: Privatdozent Dr. R. Lammers 2 Für meine Snejina 3Parts of this thesis have already been published in: Iliev DI, Wittekindt NE, Ranke MB, Binder G 2005 Structural Analysis of Human Growth Hormone with Respect to the Dominant Expression of GH Mutations in Isolated Growth Hormone Deficiency Type II. Endocrinology 146: 1411-1417 4Contents 1. Abbreviations – p. 6 2. Abstract – p. 7 3. Introduction – p. 9 4. Aim of the study – p. 16 5. Materials and methods – p.17 5.1. DNA Vectors – p.17 5.2. Cell culture – p. 19 5.3. Transfection experiments – p.19 5.4. RNA extraction and Real-time RT-PCR – p. 20 5.5 hGH and IGFBP-2 measurements – p. 20 5.6. Western blot analysis – p.