Genetic and molecular characterizations of hydrogenases and sulfate metabolism proteins of Desulfovibrio vulgaris Miyazaki F [Elektronische Ressource] / vorgelegt von Amrit Pal Kaur

Genetic and Molecular Characterizations of Hydrogenases and Sulfate Metabolism Proteins of Desulfovibrio vulgaris Miyazaki FInaugural-Dissertationzur Erlangung des Doktorgradesder Mathematisch-Naturwissenschaftlichen Fakultätder Heinrich-Heine-Universität Düsseldorfvorgelegt vonAmrit Pal Kauraus Amritsar (Indien)Düsseldorf, January 2009ZusammenfassungDer hier untersuchte Organismus Desulfovibrio vulgaris Miyazaki F (DvMF) ist seit langem bekannt auf Grund detaillierter Untersuchungen an seiner [NiFe] Hydrogenase und an Sulfat-Stoffwechselproteinen sowie einiger anderer Metallo-Enzyme, die in Zusammenhang mit den Hydrogenasen stehen. Unabhängig von den relativ guten Ausbeuten, die man für diese Proteine erzielt, ist die funktionale und genetische Manipulation schwierig, da die Sequenzen der kodierenden Gene nicht bekannt waren sind. In dieser Arbeit wurden genetische und molekularbiologische Fortschritte erzielt und weitere Informationen über den Stoffwechsel der Hydrogenasen von DvMF erhalten. Das gesamte Genom von DvMF wurde in eine Cosmid-Bankkloniert. Die Verwendung von dioxygenin-markierten DNA-Sonden aus bekannten homologen D. vulgaris Hildenborough (DvH) führte zur Identifizierung der gesuchten Gene.Sequenzen von Sie kodieren zwei zusätzliche Hydrogenasen, eine aus zwei Untereinheiten bestehende [NiFeSe] Hydrogenase (hysA und hysB) und eine sechs Untereinheiten große Ech Hydrogenase (echA -echF).