Gene transfer of keratinocytes with a human factor XIII plasmid construct [Elektronische Ressource] / vorgelegt von Laura Gabriella Horváth

Aus der Chirurgischen Universitätsklinik der Albert - Ludwigs - Universität Freiburg / Br. Abteilung Plastische und Handchirurgie Gene transfer of keratinocytes with a human Factor XIII - plasmid construct INAUGURAL – DISSERTATION zur Erlangung des Medizinischen Doktorgrades der Medizinschen Fakultät der Albert-Ludwigs-Universität Freiburg i. Br. Vorgelegt 2002 von Laura Gabriella Horváth geboren in Gy őr 2 Dekan Professor Dr. J. Zentner 1. Gutachter Professor Dr. G.B. Stark 2. Gutachter Professor Dr. W. Vanscheidt Jahr der Promotion 2004 3TABLE OF CONTENTS I. INTRODUCTION 1 1.1. Normal wound healing 1.2. Transplantation of keratinocytes 3 1.3. Gene therapeutic approaches in wound healing 3 1.4. Factor XIII 5 1.4.1. History of blood coagulation factor XIII 5 1.4.2. Protein structure of FXIII 6 1.4.3. Role of FXIII in the blood coagulation 6 1.4.4. FXIII and wound healing 9 1.5. Aim of study 10 II. MATERIALS AND METHODS 11 2.1. Molecular cloning 11 2.1.1. Restriction 2.1.2. Ligation 12 2.2. Introduction of plasmid DNA into E. coli cells 13 2.3. Analyse of the DNA 13 2.3.1. Agarose gel electrophoresis 13 2.3.2. Recovery of DNA fragments 15 2.4. Isolation of plasmid DNA 15 2.4.1. Small scale purification of DNA 15 2.4.2. Large scale purification of DNA 16 2.5.