Corrige BAC STL Biotechnologies 2016

1. Obtention d’une bactérie recombinante
1.1. Construction du plasmide recombinant
Q1. Le gène pBR322 a toutes les caractéristiques pour l’intégration du gène à exprimer : origine de
réplication, des sites de restriction et un gène discriminant les souches l’ayant intégré.
Q2.
ORI Gène amp EcoR I Hind III Gène proinsuline
Plasmide normalement sous forme circulaire
Q3. Le site de restriction BamH I se situe au niveau du gène de résistance à la tétracycline. Si le gène
recombinant est intégré au niveau de ce site, la résistance à la tétracycline ne sera pas acquise ; ce
qui permettra de distinguer les bactéries ayant intégré le gène de la proinsuline de celles ne l’ayant
pas et qui seront, elles, résistantes à la tétracycline.
1.2. Transformation bactérienne et sélection de clones de bactéries recombinantes.
Q4.
Les bactéries de type A ont été transformées par le plasmide entier. Elles possèdent les deux gènes
de résistance à l’ampicilline et à la tétracycline.
Les bactéries de type B ont intégré le plasmide recombinant ; elles sont donc résistantes uniquement
à l’ampicilline puisque le site BamH I a été coupé du fait de l’intégration du gène de la proinsuline