OBTENCIÓN DE DNA PARA EL ESTUDIO DE BLAD EN TOROS DE ARGENTINA Y ESPAÑA(DNA OBTENTION TO STUDY BLAD IN ARGENTINE AND SPANISH CATTLE)

Resumen
Un nuevo método de extracción de muestras para análisis de DNA ha sido utilizado en 24 toros de la Cooperativa de Inseminación Artificial de Venado Tuerto, CIAVT, (Argentina) y en 10 toros del Centro de Selección y Reproducción Animal, CENSYRA, de Movera (España). En estos toros se estudia la Deficiencia de Adhesión Leucocitaria Bovina (BLAD). La enfermedad se debe a una mutación en la posición 488 del gen BOVCD18A o ITG2 (Shuster et al., 1992a) consistente en el cambio de una guanina por adenina, lo que produce el cambio del aminoácido ácido aspártico por glicina en la posición 128 de la cadena de la integrina 2, que en su forma mutada determina la incapacidad de emigración leucocitaria durante el proceso inflamatorio. El estudio se lleva a cabo mediante (PCR). Los fragmentos amplificados, se digieren con el enzima de restricción Taq I y se compara el polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP), respecto de controles positivos homocigotos y heterocigotos, así como también con controles negativos y un marcador de DNA como escala de referencia de tamaño. No se han encontrado portadores o enfermos de BLAD en ninguna de las poblaciones estudiadas.
Abstract
A new method was used to obtain DNA samples from bulls in Argentina and Spain from blood drops on cards. The genomic DNA obtained was analysed for Bovine Leukocyte Deficiency Syndrome (BLAD) using the polymerase chain reaction (PCR) on the BOVCD18A gene. The amplified fragments were digested by Taq I and separated by agarose gel electrophoresis along with a positive homozygote and heterozygote BLAD control, a negative control and a DNA size marker, to look for Restriction Fragment Polymorphisms (RFLP). None of the bulls had BLAD.