Extracción y purificación de la enzima monóxido de carbono deshidrogenasa a partir de la bacteria carboxidótrofaOligotropha carboxidovorans*Extraction and purification of the enzyme carbon monoxide dehydrogenase from the carboxidotrophic bacteria Oligotropha carboxidovorans, OM 5 strain
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2005
Description
Resumen
En este trabajo se reporta la extracción y purificación de la enzima monóxido de carbono deshidrogenasa a partir de la bacteria Oligotropha carboxidovorans, cepa OM 5. La bacteria creció de manera autótrofa en un medio mineral, en una atmósfera saturada con monóxido de carbono, a 30 °C con agitación constante. Para la obtención de los extractos enzimáticos crudos, los cultivos se sometieron a ruptura por sonicación, solubilización con detergente no iónico y centrifugación con el fin de eliminar los restos celulares. En el proceso de purificación, los extractos enzimáticos crudos se pasaron a través de una columna de exclusión molecular y otra de intercambio iónico.
Abstract
This paper reports the extraction and purification of the carbon monoxide dehydrogenase enzyme from the Oligotropha carboxidovorans bacteria, OM 5 strain. The bacteria grew autotrophically in a mineral medium, in carbon monoxide saturated atmosphere, at 30°C with constant agitation. In order to obtain the crude enzymatic extracts, the crops underwent a breakdown by sonication, solvolysis with non-ionic detergent and centrifugation to eliminate the cellular debris. During the purification process, the crude enzymatic extracts were passed through a molecular exclusion column as well as through an ion-exchange one.
En este trabajo se reporta la extracción y purificación de la enzima monóxido de carbono deshidrogenasa a partir de la bacteria Oligotropha carboxidovorans, cepa OM 5. La bacteria creció de manera autótrofa en un medio mineral, en una atmósfera saturada con monóxido de carbono, a 30 °C con agitación constante. Para la obtención de los extractos enzimáticos crudos, los cultivos se sometieron a ruptura por sonicación, solubilización con detergente no iónico y centrifugación con el fin de eliminar los restos celulares. En el proceso de purificación, los extractos enzimáticos crudos se pasaron a través de una columna de exclusión molecular y otra de intercambio iónico.
Abstract
This paper reports the extraction and purification of the carbon monoxide dehydrogenase enzyme from the Oligotropha carboxidovorans bacteria, OM 5 strain. The bacteria grew autotrophically in a mineral medium, in carbon monoxide saturated atmosphere, at 30°C with constant agitation. In order to obtain the crude enzymatic extracts, the crops underwent a breakdown by sonication, solvolysis with non-ionic detergent and centrifugation to eliminate the cellular debris. During the purification process, the crude enzymatic extracts were passed through a molecular exclusion column as well as through an ion-exchange one.
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Publié le
01 janvier 2005